Coprocultivo

Los coprocultivos se realizan para identificar parásitos, enfermedades entérales y virus en el aparato gastrointestinal. De las muestras que se pueden estudiar, la que tienen más probabilidades de contener el mayor número y variedad de microorganismos es la materia fecal. En el coprocultivo clásico se examinan las heces fecales para detectar y descartar Salmonella, Shigella, Yersinia, E. coli enteropatogena y cultivos de Sthaphylococcus.

MEDIOS DE CULTIVO PARA COPROCULTIVO

EMB

ENDO

MAC CONKEY

S.S

VERDE BRILLANTE

TETRATIONATO CALDO

Un solo coprocultivo negativo no significa que ni haya enfermedad. Se recomienda realizar cuando menos tres de éstos si el cuadro clínico del paciente siguiere infección bacteriana, no obstante la presencia de un cultivo negativo presometerse a la prueba lo contactos personales del paciente para prevenir que la infección se disemine.

Cuando los parásitos se alojan en el aparato digestivo, una proporción de ellos, o las larvas, o los huevos, son eliminados con las heces. Como la cantidad que se elimina en cada defecación puede ser variable, y si hay poco número de parásitos en el intestino, lógicamente también serán escasos en las muestras que se tomen, no siempre que una muestra sale negativa se puede descartar la infección. Por eso, normalmente se toman tres muestras de heces, en tres días distintos. De esta forma se confirma la infección.

Material, Reactivos y Equipo

• Recipiente de boca ancha para recoger las heces, no es necesario que esté estéril, solo es preciso que esté limpio. No contendrá restos de jabones, detergentes, desinfectantes o iones metálicos.

• Recipiente estéril de boca ancha y cierre hermético para enviar la muestra. (Ejemplo: frasco de Urocultivos). La muestra de heces para colocar en el frasco se recoge con espátula o abatelenguas.

Muestra de materia fecal en frasco con tapa.

♦ Placas estériles de:

Agar ENDO

Agar EMB

Agar Verde Brillante.

Agar SS.

♦ Tubo de 16 x 150 con 5 ml de caldo tetrationato.

♦ Tubo de 16 x 150 con 5 ml de caldo nutritivo estéril.

♦ Mechero.

♦ Asa.

♦ Incubadora

Al día siguiente:

♦ Placas con coprocultivo.

♦ Equipo de coloración de Gram.

♦ Serie de tubos de cultivo para pruebas bioquímicas: Agar Kligler, SIM médium, Agar citrato de Simmons, Agar manitol, caldo urea, caldo dextrosado, caldo V-P, gelatina, leche descremada, etc.

♦ Mechero.

♦ Asa.

♦ Peseta.

Medios de transporte para heces. Se emplean solo si el envío de la muestra se demora y se Solicita en laboratorio de Microbiología. Existen sistemas comerciales para bacterias. ( Cary- Blair o solución de glicerol tamponado)

B.- OBTENCIÓN DE LA MUESTRA

• Solo se procesan materias líquidas o a lo sumo pastosas.

• Si son pastosas se toma una porción del recipiente donde hayan sido emitidas y se transfieren al Sistema elegido para el envío al laboratorio. Se seleccionan las partes con mucus, pus o sangre.

• En caso de heces líquidas puede utilizarse jeringa para aspirado del material fecal del recipiente en donde ha sido emitido.

• No se procesarán las muestras de materias sólidas ni contaminadas con orina.

C.- VOLUMEN MINIMO

• Heces pastosas: muestras del tamaño de una nuez son muy adecuadas pues permiten realizar la mayoría de los estudios.

• Heces líquidas entre 5 y 10 ml.

D.- TRANSPORTE

• Si la muestra no se envía en forma inmediata se debe refrigerar.

• Si se va a procesar en el plazo de 1 o 2 horas después de su emisión, no necesitan medio de transporte.

• En caso contrario se remiten las materias en un sistema de transporte para entero patógeno.

• Mientras tanto mantener refrigerada las muestras, para evitar el sobre crecimiento de la flora normal que puede enmascarar o destruir a los entero patógenos. El frío puede afectar la Viabilidad de Shigella spp.

• Para el estudio de toxinas de Clostridium difficile la muestra se puede mantener hasta 48 horas refrigerada a 4 º en la heladera.

•Es preferible enviar las muestras para estudio virológico sin medio de cultivo, pues este diluye las partículas virales disminuyendo la sensibilidad. Si su envío se retrasa mucho utilizar medio de transporte y recipientes colocados en hielo.

E.- OBSERVACIONES

Las muestras para coprocultivo, deberán tomarse antes de la administración de antimicrobianos y preferiblemente antes de tomar anti diarreicos. Indicar siempre el juicio diagnóstico de presunción y si el paciente es menor de un año. Solicitar las investigaciones especiales explícitamente (C. difficile, C. perfringens, S. aureus, etc.) En el caso de búsqueda de portadores de Salmonella, se deberá fundamentar adecuadamente el pedido y se necesitan 3 muestras negativas para asegurar que el paciente no es portador.

METODO

TOMENSE PRECAUCIONES DE ASEPSIA AL MANIPULAR LOS ESPECIMENES. AL INOCULAR EN LOS TUBOS ES INDISPENSABLE EL USO DE CUBREBOCAS Y GORRA. TRABAJAR SIEMPRE FRENTE A LA FLAMA DEL MECHERO

AISLAMIENTO.

1) Sembrar una asada de materia fecal sospechosa en el tubo de caldo de tetrationato. Inocular con asa por emulsión.

2) De la misma manera sembrar otra asada de la misma muestra en el tubo de caldo nutritivo.

3) Etiquetar con los datos escolares

4) Llevar a la incubadora a 37ºC durante 24 horas. Colocar los tubos en gradilla de rejilla, de tal manera que se mantengan en posición vertical para evitar que el líquido se derrame.

Hasta tres muestras es el número óptimo de coprocultivos para obtener un buen resultado en el aislamiento del agente infeccioso, especialmente cuando los síntomas no son claros y definitivos.

Las tinciones de Gram no son útiles pero la muestra al fresco con tinción de Loeffler puede ayudar a visualizar la presencia de leucocitos fecales, que en grandes números indican procesos inflamatorios. La morfología de los leucocitos predominantes es indicio del agente infeccioso.

Bibliografía

http://www.scribd.com/doc/8550544/coprocultivo